利用活体采卵、体外受精、体外培养技术集中生产胚胎的主要生产技术路线如下图所示:
技术路线说明:
l 供体牛的选择依据市场需要和项目长期发展需求,适应高档牛肉市场需求、适应当地生存条件及长期育肥生产顶级牛肉的BMY新品系优秀个体。
l 供体牛选择依据同胞、亲属成绩进行遗传评估,根据市场制定专门的选种指数。
l 受体牛必须是适应云南生存条件,适合于草山草地放牧、炎热气候、繁殖性能良好的婆罗门牛或BMY牛。
l 受体牛选择依据体重、健康和繁殖性能。
l 对于供体牛,记录活体采卵数量和质量,对于优秀个体进行记录,对于极差个体予以更换。活体采卵每两周一次,在气候适宜的时候开始,采卵6个月后用人工授精正常妊娠,允许供体牛维持最佳的健康状态。配种同样采取纯繁的选配路线。
l 活体采卵生产的胚胎妊娠后分娩产生的犊牛在项目核心区饲养至断奶。实施完整的登记制度,详细记录胚胎妊娠、难产、死胎、初生重、断奶重等信息,为选择最佳的种畜提供条件,为提升产业化水平奠定基础。
l 产生的优秀后代,公畜选留最优秀的5%,母畜选留最优秀的70%,做为项目的长期延伸。直至达到产能,再重新制定留种计划,保持规模不变。
l 项目后期繁殖群体基本固定后,可采取性控冻精进行体外授精,按照市场需求和项目发展方向,选定效益最佳的性别,制作性控的胚胎。
3.5 方案比较选择;
常规的核心群繁殖方案是1)人工授精,每头母牛每年最高能产一胎;2)体内胚的胚胎移植,需要使用激素进行超数排卵,平均每次超排可获得5个可用胚胎,母牛最多每年可超排3-5次;
与本项目的技术路线相比,常规的核心群繁殖方案效率低、速度慢,不能最大限度地发挥优秀母畜的遗传潜力。
本项目的成功实施依靠合作双方在技术、资源方面的合作,没有世界一流的体外采卵、体外受精、体外培养和胚胎移植技术,以及专门的胚胎体外培养液,将不能真正高效地繁育市场需要的良种肉牛。没有完善的管理,供体、受体牛的作用不能充分发挥。
3.6 项目实施计划。
第一年:
1. 建设项目核心区域的牛舍及附属设施、繁殖生物学实验室
2. 引进体外受精胚胎的专用培养液
3. 巴西专家进行OPU-IVF-ET操作,同时进行技术培训:
1) 对100头优秀BMY母牛借助超声波仪,进行活体采卵
2) 实验室选择可用的卵母细胞
3) 卵母细胞成熟(需24小时)
4) 成熟的卵母细胞进行体外受精
5) 利用专用的培养液,在保温室培养7天,至胚胎成熟
4. 胚胎体外培养的同时进行450头受体牛的同期发情
5. 成熟的胚胎必须在10小时之内进行胚胎移植
6. 借助超声波进行早期妊娠检查
7. 加强受体牛饲养管理,高效生产良种后裔
8. 重复第3-7步,每月增加210头受体牛
9. 供体牛连续采卵6个月,每月2次,然后人工授精正常妊娠。
10. 出生的优秀热带肉牛饲养至断奶,除5%公牛和70%母牛留种外,全部销售到项目区附件的农区和牧区。
第二年:
1. 利用项目核心区域的牛舍及附属设施、繁殖生物学实验室,扩大受体群至第一年的2倍
2. 巴西专家与当地技术人员共同进行OPU-IVF-ET操作:
1) 对150头优秀BMY供体母牛借助超声波仪,进行活体采卵
2) 实验室选择可用的卵母细胞
3) 卵母细胞成熟(需24小时)
4) 成熟的卵母细胞进行体外受精
5) 利用专用的培养液,在保温室培养7天,至胚胎成熟
3. 胚胎体外培养的同时进行600头受体牛的同期发情
4. 成熟的胚胎必须在10小时之内进行胚胎移植
5. 借助超声波进行早期妊娠检查
6. 加强受体牛饲养管理,高效生产良种后裔
7. 重复第3-7步,每月增加280头受体牛
8. 供体牛连续采卵6个月,每月2次,然后人工授精正常妊娠。
9. 出生的优秀热带肉牛饲养至断奶,除5%公牛和70%母牛留种外,全部销售到项目区附件的农区和牧区。
第三年:
1. 利用项目核心区域的牛舍及附属设施、繁殖生物学实验室,扩大受体群至第一年的4倍
2. 巴西专家与当地技术人员共同进行OPU-IVF-ET操作:
1) 对200头优秀BMY供体母牛借助超声波仪,进行活体采卵
2) 实验室选择可用的卵母细胞
3) 卵母细胞成熟(需24小时)
4) 胚胎体外培养成熟的卵母细胞进行体外受精
5) 利用专用的培养液,在保温室培养7天,至胚胎成熟
3. 胚胎体外培养的同时进行1000头受体牛的同期发情
4. 成熟的胚胎必须在10小时之内进行胚胎移植
5. 借助超声波进行早期妊娠检查
6. 加强受体牛饲养管理,高效生产良种后裔
7. 重复第3-7步,每月增加400头受体牛
8. 供体牛连续采卵6个月,每月2次,然后人工授精正常妊娠。
9. 出生的优秀热带肉牛饲养至断奶,除5%公牛和70%母牛留种外,全部销售到项目区附件的农区和牧区。
第4章 结论与建议
4.1 可行性研究的结论;
采用OPU-IVF-ET对牛进行集中繁殖生产主要包括八个步骤:健康检查、供体牛选择、采集卵子、体外受精和胚胎生产、受体牛选择与同期发情处理、胚胎移植、妊娠诊断、分娩与牛群饲养管理。巴西BIOTRAN公司掌握世界一流的繁殖新技术操作技巧和经验,并拥有独特的体外胚胎培养液;云南省牧草与肉牛科学院是中国南方最大、技术力量最强的专业科研机构,合作双方无论从技术水平、管理水平、良种畜群遗传水平方面,还是双方的合作意向、市场需求,都具备了实施热带肉牛的胚胎工程产业化生产的条件,技术路线先进且可行。
4.2主要建议
本项目的实施是充分利用最新生物繁殖技术并符合中国热带地区良种肉牛需求的典范,最终形成繁殖技术、选育提高、产品适应需求的良性循环将是本项目可持续性发展的根本保证。